PRMT2基因的miRNA载体构建及其活性鉴定

作     者：唐焱 周宏 钟警 姜浩 

作者机构：南华大学附属第一医院超声诊断科湖南衡阳421001 

出 版 物：《中南医学科学杂志》 (Medical Science Journal of Central South China)

年 卷 期：2012年第40卷第4期

页      码：360-363,380页

摘      要：目的构建蛋白质精氨酸甲基转移酶2(PRMT2)基因的miRNA真核表达栽体,鉴定其转染乳腺癌MCF7细胞株后的生物活性。方法根据PRMT2基因序列设计合成4对pre-miRNA片段,定向克隆到pcDNA^(TM)6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体上,采用菌落的PCR和测序分析鉴定插入序列的完整性;并将重组载体转染至MCF7细胞株中,采用Westen b1ot方法鉴定重组载体转染MCF7细胞后对PRMT2蛋白表达的干扰效果以确定其生物活性。结果构建的重组体插入片段的碱基序列完全正确,并且重组体瞬时定转染MCF7细胞后成功干扰PRMT2的表达。结论成功构建了靶向PRMT2基因的pcDNA^(TM)6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体,且在瞬时转染MCF7细胞后能下调PRMT2的表达。

主 题 词：miRNA 蛋白精氨酸N-甲基转移酶 雌激素受体α 转染 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.2095-1116.2012.04.008

馆 藏 号：203919272...