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酵母单杂交诱饵质粒pHis-3NF和pLacZ-3NF的构建与鉴定

酵母单杂交诱饵质粒pHis-3NF和pLacZ-3NF的构建与鉴定

作     者:牛永东 许丽艳 李恩民 

作者机构:汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室 汕头大学医学院肿瘤病理研究室广东汕头515031 

基  金:国家自然科学基金项目(39900069 30170428) 广东省自然科学基金资助项目(990799 010431) 广东省高校自然科学科研项目(200033) 广东省医学科研课题(A2001419) 汕头大学研究与发展基金项目(L0004 L00012) 

出 版 物:《癌变.畸变.突变》 (Carcinogenesis,Teratogenesis & Mutagenesis)

年 卷 期:2003年第15卷第1期

页      码:13-16页

摘      要:目的 :构建可以与酵母染色体组发生重组的质粒 pHis_NF和 pLacZ_NF。 方法 :人工合成44bp的三重NF_κB元件寡聚核苷酸 ,通过DNA重组技术将靶序列NF_κB串定向插入细菌_酵母穿梭质粒pHisi和pLacZi的多克隆位点MCS后 ,用特异性酶切、琼脂糖凝胶电泳、PAGE电泳、DNA测序等方法进行鉴定。 结果 :PAGE电泳和DNA测序分析证实定向插入的寡聚核苷酸串与预先设计的插入序列一致。 结论 :成功地构建了重组质粒 pHis_3NF和 pLacZ_3NF ,为借助酵母单杂交实验技术平台深入探讨NF_κB因子相关基因的转录调控机制奠定了实验材料和技术基础。

主 题 词:核转录因子 NF-κB pHis-3NF pLacZ-3NF 酵母单杂交 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 100214[100214] 0836[0836] 090102[090102] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1004-616X.2003.01.004

馆 藏 号:203921236...

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