利用TALEN系统对兔进行Tiki1基因敲除

作     者：吴彩霞 刘朝明 颜泉梅 张全军 欧阳振 赵宇 樊娜娜 赖良学 WU Caixia;LIU Zhaoming;YAN Quanmei;ZHANG Quanjun;OUYANG Zhen;ZHAO Yu;FAN Nana;LAI Liangxue

作者机构：中国科学院广州生物医药与健康研究院广东广州510530 吉林大学动物医学学院吉林长春130062 

基　　金：国家重点研发计划(2017YFA0105100) 973计划(2011CB944200) 

出 版 物：《华南农业大学学报》 (Journal of South China Agricultural University)

年 卷 期：2020年第41卷第3期

页      码：9-14页

摘      要：【目的】利用转录激活样效应因子核酸酶(TALEN)系统获得Tiki1基因敲除的兔模型,为研究Tiki1对动物早期发育作用机理提供兔源的动物模型。【方法】基于TALEN系统设计了靶向兔Tiki1基因的打靶载体,分别将10和50 ng/μL的Tiki1-TALEN mRNA注射到原核期的家兔受精卵胞质中,然后收集发育至囊胚期的胚胎,鉴定囊胚率和基因修饰效率,通过测序检验囊胚的基因突变。为了进一步获得Tiki1基因敲除兔,后续将50 ng/μL的Tiki1-TALEN mRNA注射到17个原核期的家兔受精卵胞质中,将受精卵分别移植到2只受体兔体内。【结果】注射50 ng/μL Tiki1-TALEN mRNA试验组的囊胚率(64%)与注射10 ng/μL Tiki1-TALEN mRNA试验组的囊胚率(57%)差异不大,但注射50 ng/μL Tiki1-TALEN mRNA试验组的囊胚基因修饰效率(100%)显著高于注射10 ng/μL Tiki1-TALEN mRNA试验组的囊胚基因修饰效率(14.3%)。测序结果表明,Tiki1基因的突变范围从1到28 bp缺失不等。经过胚胎移植共生出3只仔兔,其中有2只兔子能检测到基因突变。【结论】所建立的TALEN技术体系可以对家兔Tiki1基因进行高效的敲除。

主 题 词：兔 TALEN Tiki1基因 囊胚 基因敲除 基因修饰 

学科分类：0905[农学-林学类] 09[农学] 

核心收录：

D　O　I：10.7671/j.issn.1001-411X.201908011

馆 藏 号：203922796...