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qseC调控大肠杆菌生物膜形成和体内毒性的机制

qseC调控大肠杆菌生物膜形成和体内毒性的机制

作     者:蒙俊 陈华梅 罗林 吕钦 杨堃 MENG Jun;CHEN Hua-Mei;LUO Lin

作者机构:昆明医科大学第一附属医院心血管外科云南昆明650032 昆明医科大学第一附属医院麻醉科云南昆明650032 

基  金:国家自然科学基金项目(81760348 81560320) 

出 版 物:《中国老年学杂志》 (Chinese Journal of Gerontology)

年 卷 期:2020年第40卷第10期

页      码:2159-2163页

摘      要:目的研究qseC调控大肠杆菌生物膜形成和体内毒性的机制。方法通过分子生物手段敲除大肠杆菌菌株的qseC基因,然后实验分为两组,一组为大肠杆菌标准菌株K-12 MC1000菌株,一组为敲除qseC基因组的大肠杆菌K-12 MC1000菌株(MC1000ΔqseC),每组做6个平行验证。测定菌株的生长曲线,通过培养后使用酶标法检测每组菌株的生物膜量;提取每组大肠杆菌菌株的总RNA,将RNA反转录为cDNA设计引物通过实时荧光定量PCR技术分析其毒力机制。结果用鉴定引物对两菌株的克隆进行PCR验证,MC1000的扩增产物长度为1100~1200 bp,qseC基因敲除后的MC1000ΔqseC扩增结果为237 bp,与理论值相符,qseC基因敲除成功。MC1000和MC1000ΔqseC在LB培养基上的生长无明显差异。MC1000组的生物膜半定量OD值为1.12±0.02,而MC1000ΔqseC为0.59±0.03,与MC1000组菌株中的相关基因相比,MC1000ΔqseC组fim、hylA及Usp的表达量均明显降低(P<0.05)。结论qseC基因调控着大肠杆菌的生物膜形成,当敲除qseC后相关的毒力基因表达量降低,qseC调控大肠杆菌的毒力可能是通过调控fim、hylA及Usp的表达量来实现的。

主 题 词:qseC 大肠杆菌 生物膜形成 体内毒性 

学科分类:1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D O I:10.3969/j.issn.1005-9202.2020.10.043

馆 藏 号:203924336...

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