常见7种食源性致病菌xMAP液相芯片快速筛查方法的建立及应用

作     者：吕东月 石晓路 陈妙龄 吴平芳 贺连华 李迎慧 林一曼 邱亚群 扈庆华 L(U) Dongyue;SHI Xiaolu;CHEN Miaoling;WU Pingfang;HE Lianhua;LI Yinghui;LIN Yiman;QIU Yaqun;HU Qinghua

作者机构：深圳市疾病预防控制中心 

基　　金：深圳市食品安全委员会项目(No.SZSAW2010002) 

出 版 物：《卫生研究》 (Journal of Hygiene Research)

年 卷 期：2012年第41卷第1期

页      码：96-101页

摘      要：目的采用xMAP液相悬浮芯片检测方法,建立一管同时检测金黄色葡萄球菌、沙门菌、副溶血弧菌、单增李斯特菌、大肠杆菌O157∶H7、创伤弧菌和空肠弯曲菌的快速筛查方法。方法根据GenBank公布的金黄色葡萄球菌肠毒素nuc基因、沙门菌侵袭性基因ssaR、副溶血弧菌通用基因toxR、单增李斯特菌的hlyA基因、大肠杆菌O157∶H7的rfbE基因、创伤弧菌的vvh基因和空肠弯曲菌的gyrA基因,设计特异性引物和探针,利用上游引物和生物素标记的下游引物对7个靶序列进行不对称实时PCR扩增,7重实时PCR扩增产物和制备的7种偶联探针的微球在同一体系中进行杂交,最后利用藻红蛋白和生物素的亲和作用报告荧光,从而建立7种食源性致病菌的xMAP液相悬浮芯片检测法。结果 xMAP液相悬浮芯片体系检测140株菌株,均出现特异性荧光中值信号,7种食源性致病菌检测互不干扰。DNA和菌液检出限分别为1～100ng和105～108cfu/ml对56份各类食品标本进行检测,检出金黄色葡萄球菌2份、沙门菌4份、副溶血弧菌7份、单增李斯特菌1份、创伤弧菌3份,未检出大肠杆菌O157∶H7和空肠弯曲菌,此结果与传统方法分离结果相一致。结论xMAP液相悬浮芯片技术从样品处理到检测结果需3.5h左右,该方法可应用于食品安全风险监测中食源性致病菌的快速筛查和食源性致病菌的分型鉴定。

主 题 词：食源性致病菌 xMAP液相悬浮芯片技术 多重检测 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 1002[医学-临床医学类] 100403[100403] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2012.01.023

馆 藏 号：203926827...