广地龙特异性引物序列的设计及其混伪品的鉴别

作     者：张前程 文红梅 刘娜 袁琪 刘睿 崔小兵 李松 陈盛君 ZHANG Qian-cheng;WEN Hong-mei;LIU Na;YUAN Qi;LIU Rui;CUI Xiao-bing;LI Song;CHEN Sheng-jun

作者机构：南京中医药大学药学院江苏南京210023 江阴天江药业有限公司江苏江阴214434 

基　　金：江苏省研究生科研与实践创新计划项目(KYCX19-1305) 

出 版 物：《南京中医药大学学报》 (Journal of Nanjing University of Traditional Chinese Medicine)

年 卷 期：2020年第36卷第3期

页      码：408-413页

摘      要：目的通过设计特异性引物来鉴定广地龙及其混伪品。方法提取广地龙及其混伪品的DNA。利用通用引物COⅠ序列对广地龙及其混伪品进行PCR扩增,并对扩增产物进行双向测序。通过比对广地龙及其混伪品的COⅠ序列,找出广地龙的变异位点,设计出广地龙的特异性引物,用于广地龙及其混伪品的鉴定。对PCR反应条件退火温度、循环次数、DNA模板量和Taq酶用量进行适应性考察。结果COⅠ序列不存在特异性,不同物种、不同品种的动物药均可扩增出750 bp大小的片段,无法鉴定广地龙及其混伪品。通过比对广地龙及其混伪品的COⅠ序列,设计出广地龙的特异性引物PA-f/PA-r。在建立的PCR反应体系中,只有广地龙可以获得574 bp的基因片段,其他混伪品未扩增出相应条带。结论设计的广地龙特异性引物可以准确、成功鉴别广地龙,与其他混伪品区分,为广地龙的品种鉴别提供了有效的方法。

主 题 词：广地龙 DNA 特异性引物 鉴别 混伪品 

学科分类：1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.14148/j.issn.1672-0482.2020.0408

馆 藏 号：203930904...