人血管内皮生长因子C基因真核表达载体的构建及鉴定

作     者：陈星 糜若然 伊铁忠 瞿全新 熊冬生 邵晓枫 姜文国 许元富 杨纯正 郑曙民 

作者机构：天津医科大学总医院妇产科天津市300052 中国医学科学院协和医科大学血液学研究所药物室国家重点实验室 山西省肿瘤医院妇科 

基　　金：天津市自然科学基金项目资助(编号:973608511) 

出 版 物：《中国肿瘤临床》 (Chinese Journal of Clinical Oncology)

年 卷 期：2006年第33卷第11期

页      码：625-628页

摘      要：目的:克隆血管内皮生长因子C(VascularEndothelialGrowthFactorC)功能片段的cDNA,构建人VEGF-C基因的真核表达载体,以便进一步研究VEGF-C在宫颈癌中表达的意义及在淋巴管生长及转移中的作用。方法:根据人VEGF-CcDNA序列,设计合成二对特异性引物,第一对5 端含有EcoRⅠ及第二对3 端含有XhoⅠ酶切位点。运用RT-PCR法克隆人MDA-MB231中的VEGF-CcDNA部分编码序列(CDS);经双酶切后将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),重组质粒在处于感受态的大肠杆菌DH5α中扩增,纯化。通过PCR和双酶切鉴定阳性重组子及进行基因序列的测定。结果:用RT-PCR克隆到VEGF-CcDNA部分CDS;PCR和双酶切鉴定阳性重组子,显示有人VEGF-CcDNA编码序列,基因序列测定显示重组质粒上插入的人VEGF-C序列正确。结论:从富含VEGF-C的人MDA-MB231细胞系中克隆得到的VEGF-C基因功能片段cDNA,成功构建了人真核表达载体pcDNA3.1(+)/VEGF-C。

主 题 词：血管内皮生长因子 克隆 真核表达栽体 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-8179.2006.11.008

馆 藏 号：203932101...