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樱花基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

樱花基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

作     者:陈芳 周春玲 韩德铎 

作者机构:莱阳农学院环境艺术学院山东青岛266109 聊城大学历史文化学院山东聊城252059 

基  金:莱阳农学院博士启动基金项目(编号:630425) 

出 版 物:《江苏农业科学》 (Jiangsu Agricultural Sciences)

年 卷 期:2007年第35卷第2期

页      码:85-88页

摘      要:为确保樱花RAPD扩增结果的稳定性和重复性,对Mg^2+、dNTP、引物、模板DNA浓度、Taq酶用量、退火温度,以及PCR循环次数等影响樱花RAPD结果的重要因素进行了初步探索。试验表明,樱花RAPD扩增最适反应体系为20μl反应液中:1×PCR buffer,2.5 mmol/L MgCl2,0.15 mmol/L dNTP,1 UTaq酶,0.2μmol/L 10bp随机引物,20-30 ng模板DNA。最佳扩增程序为:94℃预变性4 min,94℃变性30 s,38℃退火30 s,72℃延伸2 min,循环40次,最后72℃延伸10 min,12℃保存。

主 题 词:樱花 RAPD 反应体系 优化 

学科分类:090706[090706] 0907[农学-草药学] 09[农学] 

D O I:10.3969/j.issn.1002-1302.2007.02.034

馆 藏 号:203932366...

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