人乳头瘤病毒16型L1基因真核表达载体的构建及表达

作     者：赵丽晶 赵淑华 许多 刘艳波 梁作文 张灵 赵雪俭 

作者机构：吉林大学白求恩医学院病理生理教研室吉林长春130021 吉林大学第二医院妇产科 北华大学基础医学院病理生理学教研室 

基　　金：国家自然科学基金(批准号:30670825)资助 

出 版 物：《中国实验诊断学》 (Chinese Journal of Laboratory Diagnosis)

年 卷 期：2009年第13卷第11期

页      码：1488-1490页

摘      要：目的从感染人乳头瘤病毒(HPV)的新鲜宫颈癌组织中扩增HPV16型晚期蛋白L1基因全长,构建表达载体,并验证目的蛋白的表达。方法根据基因全长设计一对特异引物,用PCR的方法从宫颈癌组织DNA中获得L1基因,以pMD18T为克隆载体,构建重组质粒进行亚克隆,再以pcDNA3.1(+)为载体构建表达质粒,转染至人肝细胞系H7702,提取蛋白,采用Western Blot方法检测HPV16-L1蛋白的表达。结果从长春地区宫颈癌临床标本克隆到的HPV16型L1蛋白编码序列与Genebank报道序列高度同源,其真核表达产物与特异性抗体能够特异性结合。结论成功构建重组表达质粒pcDNA3.1(+)-HPV16-L1,为进一步研制HPV预防性疫苗创造基础条件。

主 题 词：人乳头瘤病毒 L1基因 真核表达载体 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-4287.2009.11.002

馆 藏 号：203933363...