胃癌KATO-Ⅲ细胞CD133基因的siRNA干扰及其效果比较

作     者：王守练 俞继卫 陆瑞祺 蔡成 吴巨钢 倪晓春 姜波健 WANG Shou-lian;YU Ji-wei;LU Rui-qi;CAI Cheng;WU Ju-gang;NI Xiao-chun;JIANG Bo-jian

作者机构：上海交通大学医学院附属第三人民医院普外一科上海201900 

基　　金：国家自然科学基金(No.81101850) 上海市卫生局重点基金(No.2010018) 上海市教委基金(No.jdy10022) 上海交通大学医学院科研基金(No.YZ1055) 

出 版 物：《国际外科学杂志》 (International Journal of Surgery)

年 卷 期：2012年第39卷第11期

页      码：755-759,F0004页

摘      要：目的比较3段化学合成的siRNA对KATO-Ⅲ胃癌细胞中CDl33基因的抑制效果，并初步探讨CDl33基因表达被抑制后对胃癌细胞增生的影响。方法实验分为空白对照组、阴性对照组、CDl33siRNA-1组，CD133siRNA-2组和CD133siRNA-3组。针对CD133mRNA序列设计并合成3段siRNA，利用荧光标记的siRNA转染KATO-Ⅲ胃癌细胞后，通过共聚焦显微镜荧光计数检测其转染率，用RT—PCR法和Western blot法检测并比较3段siRNA对CD133基因表达的沉默效果，采用CCK-8法检测CD133表达被抑制后对胃癌细胞增生的影响。结果siRNA在KATO—Ⅲ细胞中的转染效率可达到（85±8）％，所设计的3段siRNA均可显著抑制胃癌KATO—Ⅲ细胞CD133基因的表达，抑制率分别为（11±2）％、（19±2）％和（24±3）％。与空白组比较，CDl33siRNA-3转染组细胞的增生活性降低了（42±4）％（P〈0．05）。结论成功转染并抑制了KATO—Ⅲ胃癌细胞中CD133基因的表达，并从中筛选出了干扰效果最佳的CDl33siRNA片段，为后续CD133^＋胃癌细胞的干扰提供初步的实验研究。

主 题 词：胃肿瘤 癌 干细胞 RNAi CD133 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1673-4203.2012.11.011

馆 藏 号：203934772...