产肠毒素大肠杆菌快速检测方法的建立和评价

作     者：张小飞 张召军 张广州 崔晓霞 赵爽 定明 白杰英 曾林 ZHANG Xiao-fei;ZHANG Zhao-jun;ZHANG Guang-zhou;CUI Xiao-xia;ZHAO Shuang;DING Ming;BAI Jie-ying;ZENG Lin

作者机构：军事医学科学院实验动物中心北京100071 

基　　金："十二五"面上项目(CWS11J092) "十二五"专项课题(2011ZXJ09201-031)支持 

出 版 物：《中国实验动物学报》 (Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica)

年 卷 期：2013年第21卷第5期

页      码：31-35,I0007,I0008页

摘      要：目的利用环介导等温扩增(LAMP)技术,建立产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的快速、便捷、敏感、特异的检测方法,并对该方法的特异性和敏感性进行评价,为实验动物检测和细菌性腹泻的诊断提供技术支持。方法根据GenBank公布的产肠毒素大肠杆菌的LT毒素基因序列(S60731.1)设计外引物和内引物进行LAMP扩增,对LAMP特异性和敏感性与PCR方法做比较。结果建立的LAMP方法检测最低浓度为100 pg/μL,灵敏度是PCR的10倍以上并具有较高的特异性,利用该方法对27份猴腹泻样品进行LAMP和PCR方法检测,发现PCR检出率为33.3%,LAMP(60 min内)结果与PCR相同,而LAMP(90 min内)检出率为92.6%,约是PCR检出率的3倍。结论建立了一种用于检测肠毒性大肠杆菌(ETEC)的LAMP检测方法,该方法特异性强,灵敏度高,方便快捷,适合于ETEC临床快速检测。

主 题 词：产肠毒素大肠杆菌 LAMP 诊断 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071002[071002] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-4847.2013.05.007

馆 藏 号：203935145...