三种连接子多肽对抗癌融合蛋白翻译后剪切效果比较研究

作     者：李红艳 周志明 潘强 杨冬梅 顾锦法 沈佳妮 王世兵 章康健 

作者机构：浙江理工大学生命科学学院新元医学与生物技术研究所杭州310018 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所上海200031 

基　　金：浙江理工大学项目(1204807-Y) 浙江理工大学科研启动基金(11610032611303) 国家重点基础研究发展计划(973)(2010CB529901 2011CB510100) 浙江省自然科学基金(LY13H080005) 上海自然科学基金(13ZR1446300)资助项目~~ 

出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期：2014年第41卷第6期

页      码：558-566页

摘      要：IL-24和Smac为靶向癌症的多基因治疗研究中重要的候选基因.在构建IL-24和Smac双基因表达载体过程中,选择一个稳定高效的连接子非常关键.利用三个不同的连接子多肽序列IETD、EEED、F2A构建三个真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IL-24-IETD-Smac、pcDNA3.1(+)-IL-24-EEED-Smac、pcDNA3.1(+)-IL-24-F2A-Smac,并联合5-氟尿嘧啶(5-FU)处理研究各连接子介导的融合蛋白剪切效果.上述实验结果表明,在三种IL-24-linker-Smac双基因表达载体中,F2A连接子剪切效果最佳且与caspase活性成正相关.IETD、EEED连接子介导的融合蛋白都有一定的剪切,但IETD/EEED多肽影响了上游IL-24蛋白的半衰期,加速了剪切后IL-24蛋白的泛素化降解.本研究为构建靶向癌症应用的双基因或多基因载体提供了设计参考.

主 题 词：连接子多肽 IETD EEED F2A caspase活性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 071010[071010] 07[理学] 071009[071009] 09[农学] 0703[理学-化学类] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3724/sp.j.1206.2013.00489

馆 藏 号：203935431...