全细菌SELEX技术筛选鸟分枝杆菌的适配子

作     者：王培培 刘焰 罗凤玲 章晓联 WANG Pei-pei;LIU Yan;LUO Feng-ling;ZHANG Xiao-lian

作者机构：武汉大学基础医学院免疫学系病毒学国家重点实验室湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室湖北武汉430071 

基　　金：国家重大传染病专项(No.2012ZX10003002-015) 国家自然科学基金项目(No.31270176) 湖北省自然科学基金项目(No.2014CFB719) 湖北省医学领军人才项目(No.523-276003) 教育部博士点基金(No.20100141120056) 

出 版 物：《中国病原生物学杂志》 (Journal of Pathogen Biology)

年 卷 期：2015年第10卷第2期

页      码：113-117,179页

摘      要：目的应用指数级富集配体系统进化技术(system evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)筛选与鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium)特异性结合的ssDNA适配子,建立酶联寡聚核苷酸吸附试验(enzyme-linked oligonucleotide assay,ELONA)检测鸟分枝杆菌的方法。方法设计并合成随机序列ssDNA文库,以鸟分枝杆菌为靶标,利用SELEX技术筛选特异性的ssDNA适配子,将亲和力最高的适配子进行克隆、测序;用DNAMAN软件分析适配子的二级结构,并检测其特异性。结果单适配子N1与鸟分枝杆菌结合的Kd为(246±21.87)nmol/L,即亲和力最高,而对结核分枝杆菌等其他分枝杆菌亲和力较低。结论应用SELEX筛选的鸟分枝杆菌ssDNA适配子N1具有较高亲和力和特异性,可作为鸟分枝杆菌检测及艾滋病合并鸟分枝杆菌感染的特异性诊断制剂。

主 题 词：鸟分枝杆菌 SELEX 适配子 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.13350/j.cjpb.150204

馆 藏 号：203935912...