小干扰RNA靶向沉默整合素连接激酶基因对宫颈鳞状上皮细胞生物学行为的影响

作     者：李晓丹 费晓莺 王敬苗 霍晓燕 于华 LI Xiaodan;FEI Xiaoying;WANG Jingmiao;HUO Xiaoyan;YU Hua

作者机构：邯郸市第一医院妇科河北邯郸056002 

基　　金：邯郸市科学技术研究与发展计划项目(编号:1723208066-2) 

出 版 物：《新乡医学院学报》 (Journal of Xinxiang Medical University)

年 卷 期：2020年第37卷第5期

页      码：425-429页

摘      要：目的探讨小干扰RNA(siRNA)靶向沉默整合素连接激酶(ILK)基因对宫颈鳞状上皮细胞(H8细胞)增殖、迁移和侵袭等生物学行为的影响。方法设计高效的靶向沉默ILK的siRNA,构建ILK-siRNA脂质体和无关对照质粒。将H8细胞随机分为ILK基因沉默组、阴性对照组和空白组,ILK基因沉默组H8细胞转染ILK-siRNA,阴性对照组细胞转染无关对照质粒,空白组细胞不转染任何序列,转染后继续培养48 h。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测H8细胞中ILK mRNA相对表达量,Western blot法检测H8细胞中ILK蛋白相对表达量,四甲基偶氮唑盐法检测H8细胞活力,Transwell实验检测H8细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,免疫组织化学法检测H8细胞内Ki-67蛋白表达。结果ILK基因沉默组H8细胞中ILK mRNA和蛋白相对表达量显著低于阴性对照组和空白组(P0.05)。ILK基因沉默组H8细胞活力显著低于空白组和阴性对照组(P0.05)。空白组、阴性对照组和ILK基因沉默组H8细胞Ki-67蛋白阳性表达率分别为(20.01±0.31)%、(21.01±0.11)%、(12.01±0.01)%,ILK基因沉默组H8细胞Ki-67蛋白阳性表达率显著低于阴性对照组和空白组(P0.05)。空白组、阴性对照组和ILK基因沉默组穿膜细胞数分别为28.13±2.44、30.24±2.15、18.52±2.25,ILK基因沉默组穿膜细胞数显著少于空白组和阴性对照组(P0.05)。空白组、阴性对照组和ILK基因沉默组H8细胞迁移率分别为(15.51±4.88)%、(15.11±5.21)%、(6.91±5.12)%,ILK基因沉默组H8细胞迁移率显著低于阴性对照组和空白组(P0.05)。结论ILK参与调控宫颈鳞状上皮细胞的增殖、迁移以及侵袭,可能在宫颈癌的发生、发展中发挥重要作用;沉默ILK基因可以抑制H8细胞的增殖、迁移和侵袭能力,ILK有望成为宫颈癌靶向治疗的新靶点。

主 题 词：整合素连接激酶 宫颈鳞状上皮细胞 宫颈癌 小干扰RNA 靶向沉默 细胞增殖 细胞侵袭 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.7683/xxyxyxb.2020.05.006

馆 藏 号：203936961...