CRISPR/Cas 9系统构建敲除FN表达的卵巢癌稳定表达细胞系研究

作     者：霍茜瑜 邵艳宏 程优 刘亚珊 李雪 刘运德 鲍会静 HUO Qianyu;SHAO Yanhong;CHENG You;LIU Yashan;LI Xue;LIU Yunde;BAO Huijing

作者机构：天津医科大学医学技术学院300203 天津医科大学朱宪彝纪念医院300400 天津市南开医院精准整合医学实验室300100 

出 版 物：《重庆医学》 (Chongqing medicine)

年 卷 期：2020年第49卷第11期

页      码：1737-1741,1745页

摘      要：目的利用CRISPR/Cas 9系统在人卵巢癌细胞系OVCAR3中构建敲除纤维连接蛋白(FN)表达的稳定表达细胞系。方法检测4株卵巢癌细胞系FN表达情况。使用E-CRISP网站设计针对FN基因的向导RNA(sgRNA)序列,将序列连接到lenti-CRISPR-V2质粒后转染高表达FN的OVCAR3细胞。鉴定构建的细胞系FN表达情况。结果在4株细胞系中选择高表达FN的OVCAR3细胞转入测序结果正确的lenti-CRISPR-V2-FN-sgRNA重组质粒,q-PCR和Western blot方法验证结果显示,其成功降低了卵巢癌OVCAR3细胞的FN的表达水平。结论CRISPR/Cas 9系统能建立敲除FN表达的卵巢癌稳定表达细胞系。

主 题 词：卵巢肿瘤 纤维连接蛋白 基因敲除技术 CRISPR/Cas 9 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100211[100211] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1671-8348.2020.11.004

馆 藏 号：203939417...