低免疫原性脱细胞神经基质的制备及其理化性能

作     者：王建英 李芳红 李花琼 王荣华 王辰飞 赵子建 WANG Jianying;LI Fanghong;LI Huaqiong;WANG Ronghua;WANG Chenfei;ZHAO Allan Zijian

作者机构：温州医科大学眼视光学院生物医学工程学院浙江温州325035 广东工业大学生物医药学院广东广州510006 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81630021) 广东省创新研究团队计划项目(2016ZT06Y432) 温州市领军型创新团队项目(TY2016002) 

出 版 物：《温州医科大学学报》 (Journal of Wenzhou Medical University)

年 卷 期：2020年第50卷第6期

页      码：431-437页

摘      要：目的:制备低免疫原性异种脱细胞神经基质并评估其理化性能。方法:以α-1,3-半乳糖苷转移酶基因敲除(GTKO)猪坐骨神经为实验原料对基因敲除猪坐骨神经进行脱细胞处理制备低免疫原性异种脱细胞神经基质,通过HE、DAPI染色及DNA残留量检测评价神经组织的脱细胞效果;I型胶原、层黏连蛋白、纤连蛋白免疫组织化学及天狼猩红染色评价脱细胞神经细胞外基质组分保留情况;α-1,3-半乳糖基(a-gal)免疫荧光检测异种抗原a-gal的残留;扫描电镜(SEM)分析脱细胞神经三维组织结构及孔隙率。结果:组织染色显示脱细胞神经基质内膜、外膜、束膜中的细胞均去除干净,DNA定量结果显示DNA含量下降了95%。天狼猩红染色及免疫组织化学结果显示脱细胞神经组织较好地保留了胶原纤维与细胞外基质主要蛋白。SEM结果显示脱细胞神经较好地保留了其三维组织结构,细胞毒性检测表明脱细胞神经基质无细胞毒性。结论:本研究自主设计的四联脱细胞方案能彻底去除神经组织中的细胞成分与异种抗原,并且较完整地保留了神经组织结构,与天然神经具有高度相似性。

主 题 词：脱细胞 低免疫原性 细胞外基质 神经移植物 基因敲除 

学科分类：08[工学] 080501[080501] 0805[工学-能源动力学] 080502[080502] 

D　O　I：10.3969/j.issn.2095-9400.2020.06.001

馆 藏 号：203940695...