基于529bp高度重复序列的弓形虫PCR诊断方法的建立

作     者：方强 夏惠 陈兴智 徐家森 王雪梅 齐文娟 孙新 沈继龙 FANG Qiang;XIA Hui;CHEN Xing-zhi;XU Jia-sen;WANG Xue-mei;QI Wen-juan;SUN Xin;SHEN Ji-long

作者机构：蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030 安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032 

基　　金：国家重点基础研究发展计划(973计划)资助(2010CB530001) 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2010年第23卷第7期

页      码：767-769页

摘      要：目的建立基于529bp高度重复序列的弓形虫PCR诊断方法。方法以弓形虫基因组中529bp的高度重复序列为诊断靶基因设计引物,并以其为模板经PCR扩增该基因,与pMD18-T载体连接,构建pMD18/Tox529bp重组质粒,测序鉴定正确后,经稀释标定作为标准品。优化PCR反应体系及条件,并验证该方法的灵敏度及特异性。结果所构建的pMD18/Tox529bp重组质粒经测序正确,建立的PCR方法最低可检出10个拷贝的目的基因,除对弓形虫基因组DNA扩增出特异性条带外,用该方法对健康志愿者全血、正常小鼠全血、间日疟原虫、恶性疟原虫及结核杆菌基因组DNA均未扩增出特异性条带。结论已建立了一种具有较高灵敏度和特异性的弓形虫PCR诊断方法 ,有望应用于人和动物弓形虫感染的筛查、临床诊断及流行病学调查。

主 题 词：弓形虫病 重复序列,核酸 聚合酶链反应 

学科分类：07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 090102[090102] 0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 0703[理学-化学类] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13200/j.cjb.2010.07.100.fangq.022

馆 藏 号：203941929...