高灵敏度巢式PCR方法扩增HBV全长基因组

作     者：张天英 陈清瑞 杨炳春 陈仕海 袁权 葛胜祥 ZHANG Tian-ying;CHEN Qing-rui;YANG Bing-chun;CHEN Shi-hai;YUAN Quan;GE Sheng-xiang

作者机构：厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361005 

基　　金：福建省自然科学杰出青年基金项目(2009J06020) 

出 版 物：《厦门大学学报（自然科学版）》 (Journal of Xiamen University：Natural Science)

年 卷 期：2011年第50卷第5期

页      码：947-950页

摘      要：探讨一种用于乙型肝炎病毒（HBV）基因组扩增的灵敏度高、广谱性好的巢式聚合酶链式反应（nested PCR）方法，适用于较低病毒拷贝数标本的HBVDNA扩增．通过设计两套通用巢式引物。实现对各基因型（A，B，C，D，E，G）HBV均具有较高的扩增效率；采用两步法分段扩增HBV基因组，对两段目的产物进行测序拼接获得HBV的全基因序列．应用本方法对4组病毒拷贝量（IU／mL）分别为：〉1．0×10^4，1．0×10^3～1．0×10^，2．0×10^2～1．0×10^3，〈2．0×10^2的100份血清标本进行全长基因组扩增，其中75份获得阳性结果，各组阳性率依次为：100％，66．7％，60％，25％．有效扩增灵敏度为2．0×10^2～1．0×10^3IU／mL；而一步法只在病毒拷贝量〉1．0×10^4 IU／mL的标本组中获得15份阳性结果，总的阳性率仅为15％，说明该方法扩增灵敏度明显高于一步法．因此。本方法为HBV流行病学调查研究HBV基因组序列提供了更高的灵敏度，可在流行病学调查中发挥重要作用．

主 题 词：乙型肝炎病毒 基因组 巢式聚合酶链式反应 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

核心收录：

馆 藏 号：203942264...