dsRNA介导的抗ToMV和CMV植物表达载体的构建

作     者：张伟 刘炜炜 秦荣 张建云 黄家风 ZHANG Wei;LIU Wei-wei;QIN Rong;ZHANG Jian-yun;HUANG Jia-feng

作者机构：石河子大学绿洲农作物病害防控重点实验室新疆石河子832003 

基　　金：国家自然科学基金(30860162) 

出 版 物：《新疆农业科学》 (Xinjiang Agricultural Sciences)

年 卷 期：2012年第49卷第7期

页      码：1250-1255页

摘      要：[目的]构建通过表达dsRNA,诱导植物基因沉默机制可抗2种病毒的表达载体。[方法]根据已报道番茄花叶病毒(ToMV)的运动蛋白基因(MP)和黄瓜花叶病毒(CMV)的沉默抑制子基因(2b)的核苷酸序列设计特异性引物,扩增到部分△MP和2b基因;然后通过重组PCR技术将2个病毒基因进行融合,获得长度为676 bp的融合基因△MP-2b。再将融合基因以反向重复的方式与大豆内含子相连,并定向插入到植物表达载体pBIN438上35S启动子下游。[结果]构建了含两种不同病毒来源基因的植物表达载体pBIN438△MP-2b(i/r)。酶切和PCR鉴定证明所构建的载体与预期的设计完全一致。[结论]为利用RNA沉默原理进行植物广谱抗病研究奠定了基础。

主 题 词：重组PCR 融合基因 RNA沉默 载体构建 双价抗性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 0828[工学-建筑类] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.6048/j.issn.1001-4330.2012.07.012

馆 藏 号：203942303...