鸡lncRNA-CEPT8启动子验证及活性核心区域筛选

作     者：金晶 余昕健 靳锴 李婷婷 张晨 左其生 李碧春 JIN Jing;YU Xinjian;JIN Kai;LI Tingting;ZHANG Chen;ZUO Qisheng;LI Bichun

作者机构：扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223 

基　　金：江苏省科技计划(青年基金)(BK20180918) 江苏省高校自然科学研究项目(18KJB230008) 江苏省研究生科研与实践创新计划项目(KYCX19_2114) 国家重点研发计划(2017YFE0108000) 国家自然科学基金项目(31872341) 

出 版 物：《中国家禽》 (China Poultry)

年 卷 期：2020年第42卷第6期

页      码：15-20页

摘      要：研究旨在筛选鸡lncRNA-CEPT8启动子核心区域并验证其启动活性。采用qRT-PCR检测lncRNA-CEPT8在鸡不同组织中表达情况。生物信息学预测lncRNA-CEPT8启动子区域,PCR扩增启动子并构建pEGFP-lncCEPT8重组载体,转染DF-1细胞后48 h进行荧光观察。再构建启动子系列缺失载体(pGL3-p1、pGL3-p2、pGL3-p3、pGL3-p4、pGL3-p5),分别转染DF-1细胞后48 h检测双荧光素酶活性,分析缺失载体的启动活性。结果表明,lncRNA-CEPT8在鸡生殖嵴中特异性高表达,pEGFP-lncCEPT8重组载体转染DF-1细胞后有绿色荧光。缺失载体pGL3-p4与pGL3-p3相比,活性极显著下降(P<0.01)。研究明确了lncRNA-CEPT8上游-1174^-1 bp处为启动子,且-627^-429bp是启动子核心区域,为进一步研究其表达调控机制提供理论依据。

主 题 词：鸡 启动子 lncRNA 核心区域 

学科分类：0905[农学-林学类] 09[农学] 090501[090501] 

D　O　I：10.16372/j.issn.1004-6364.2020.06.003

馆 藏 号：203944140...