西藏环状病毒RT-PCR检测方法的建立

作     者：元正菊 李楠 何于雯 孟锦昕 王静林 

作者机构：云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室云南昆明650224 

基　　金：云南省科技厅重点基金项目(2019FA015) 国家自然科学基金项目(31660714,31460669) 国家重点研发计划项目(2016YFD0500303) 云南省科技人才和平台计划项目(2018HB046) 

出 版 物：《云南畜牧兽医》 (Yunnan Journal of Animal Science and Veterinary Medicine)

年 卷 期：2020年第3期

页      码：10-13页

摘      要：建立西藏环状病毒(Tibet orbivirus, TIBOV)RT-PCR诊断方法。根据云南省新分离到的TIBOV Seg-7片段序列设计1套巢式引物为120S7F1/R1、120S7F2/R2。以TIBOV DH13C120株病毒核酸为模板,优化反应条件,建立巢式RT-PCR检测方法,并对云南省新分离的9株TIBOV进行核酸检测。分别采用外引物(120S7F1/R1)和内引物(120S7F2/R2)对TIBOV DH13C120株进行RT-PCR扩增,退火温度分别为52℃和54℃,外引物扩增出片段大小为1 050 bp条带;内引物扩增出的片段大小为500bp,扩增条带大小与设计预期相一致。而蓝舌病毒(BTV)JCC12-7株和阴性对照两轮扩增均为阴性,采用该方法对云南省新分离的9株TIBOV、2株BTV和1株鹿流行性出血热病毒(EHDV)进行检测,9株TIBOV扩增均为阳性,而BTV、EHDV和阴性对照均为阴性。建立了TIBOV巢式RT-PCR检测方法,该方法可用于云南省目前动物或媒介中流行的TIBOV核酸检测。

主 题 词：西藏环状病毒 巢式引物 RT-PCR检测方法建立 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203946928...