一种单个胚胎的DNA模板制备方法

作     者：李军锋 李海峰 宋艳画 孙燕 张家骅 LI Jun-Feng;LI Hai-Feng;SONG Yan-Hua;SUN Yan;ZHANG Jia-Hua

作者机构：西南农业大学重庆市牧草与草食家畜重点实验室重庆400716 

基　　金：重庆市科委项目(编号:7380)资助~~ 

出 版 物：《遗传》 (Hereditas（Beijing))

年 卷 期：2005年第27卷第5期

页      码：797-800页

摘      要：建立了一种简单处理单个卵子和早期胚胎制备DNA模板的方法———KOH/DTT-Triton X裂解法,并与TE-蛋白酶K法比较了PCR扩增效率。结果表明:采用KOH/DTT-Triton X裂解法处理单个卵子或2-细胞胚、8-细胞胚、桑椹胚、囊胚后,作为DNA模板直接进行PCR扩增线粒体DNA片段,3对引物的PCR扩增总成功率为100%(70/70),而TE-蛋白酶K法处理的单个卵子的PCR扩增总成功率为92.9%(65/70),二者差异显著(P<0.05)。但两种方法所制备模板的PCR假阳性率均为0。实验设计的KOH/DTT-Triton X裂解法是一种有效的单个早期胚胎的DNA模板制备方法,经一次PCR扩增即能获得清晰的目的DNA条带,能够满足早期胚胎遗传物质检测的需要。

主 题 词：卵子 胚胎 聚合酶链式反应 DNA模板制备 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:0253-9772.2005.05.021

馆 藏 号：203947239...