PCR反向线点杂交鉴定常见念珠菌的研究

作     者：向华国 熊礼宽 周华 苏放明 涂植光 XIANG Hua-guo;XIONG Li-kuan;ZHOU Hua;SU Fang-ming;TU Zhi-guang

作者机构：重庆医科大学医学检验系 深圳市慢性病防治院性病防治中心 深圳市人民医院妇科 

基　　金：深圳市科研基金(2005116) 

出 版 物：《中华皮肤科杂志》 (Chinese Journal of Dermatology)

年 卷 期：2007年第40卷第8期

页      码：485-488页

摘      要：目的建立PCR反向线点杂交技术(PCR-RLB)快速检测和鉴定常见念珠菌的方法。方法以念珠菌属间隔序列Ⅱ(ITS2)为靶基因设计通用引物,用生物素标记反义引物,PCR扩增白念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、光滑念球菌、近平滑念珠菌、都柏林念珠菌DNA,然后与通过氨基标记固定在尼龙膜上的各特异性寡核苷酸探针杂交,并进行临床标本和分离株的检测。结果念珠菌标准菌株可扩增出302～441 bp DNA片段,6种特异性寡核苷酸探针可分别与相应念珠菌PCR产物杂交,其敏感性为10 cfu/mL。通过对100例分离株的检测,然后与培养法鉴定(Merieux Vitek)的结果比较,有97株与培养结果一致,另外3株通过DNA测序结果证实与PCR-RLB测定结果一致。通过对200例女性阴道拭子进行检测,PCR-RLB阳性率为49%,而涂片法和培养法阳性率分别为27%和39%,明显高于涂片法和培养法(P<0.05)。结论该方法可快速、敏感、准确鉴定临床上常见的念珠菌。

主 题 词：核酸杂交 念珠菌属 寡核苷核探针 聚合酶链反应 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1010[医学-医学技术类] 100215[100215] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/j.issn:0412-4030.2007.08.011

馆 藏 号：203947785...