牛支原体、牛多杀性巴氏杆菌和牛结核分枝杆菌三重PCR快速检测方法的建立

作     者：杨莉 余波 张涛 姜玲玲 刘镜 杨丽娟 孙启跃 徐景峨 龙玲 唐远江 余国富 邹茂华 吴位珩 YANG Li;YU Bo;ZHANG Tao;JIANG Lingling;LIU Jing;YANG Lijuan;SUN Qiyue;XU Jing’e;LONG Ling;TANG Yuanjiang;YU Guofu;ZOU Maohua;WU Weiheng

作者机构：贵州省农业科学院畜牧兽医研究所贵州贵阳550005 贵州省清镇市动物疫病疫防控制中心贵州清镇551400 贵州省黔西县农业农村局贵州黔西551500 

基　　金：贵州省农业攻关计划项目“肉牛支原体病防控关键技术研究”[黔科合支撑(2016)2503] 贵州省农业农村厅项目“贵州省现代肉牛产业技术体系建设”(GZCYTX-0301) 贵州省科技厅项目“贵州省肉牛养殖工程技术研究中心建设项目”[黔科合平台人才(2016)5201] 贵州省科技厅项目“牛羊产业高值化配套技术集成应用与科技帮扶行动计划”[黔科合服企(2019)4010] 贵州省科学科技重点项目“贵州优质专用肉牛品种选育”[黔科合NY(2015)3002] 贵州省科技计划项目“贵州肉牛标准化养殖关键技术示范与推广”[黔科合成果(2019)4295] 

出 版 物：《贵州农业科学》 (Guizhou Agricultural Sciences)

年 卷 期：2020年第48卷第5期

页      码：92-96页

摘      要：为建立快速、准确的检测牛呼吸道主要病原菌牛支原体(Mycoplasma bovis)、牛多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)及牛结核分枝杆菌(***)的方法,对牛支原体oppD基因序列、牛多杀性巴氏杆菌Pm-kmt基因序列、牛结核分枝杆菌IS6110基因序列分别设计特异性引物,对单一PCR检测方法进行优化后建立三重PCR检测方法。结果表明:三重PCR的最佳扩增条件为94℃预变性10min;94℃1min,60℃50s,72℃1min,循环30次;72℃延伸10min。建立的三重PCR方法能对同一样本中的3种病原菌进行扩增,特异性强。牛支原体、牛多杀性巴氏杆菌和牛结核分枝杆菌的最低检测DNA浓度分别为5.306×10^-3ng/μL、3.075×10^-2ng/μL和1.605×10^-4ng/μL。建立的三重PCR方法临床检测牛支原体肺炎鼻拭子、牛结核分枝杆菌、结核菌素与单一PCR检测方法的阳性符合率为100%。三重PCR检测方法可用于牛支原体、牛多杀性巴氏杆菌、牛结核分枝杆菌的单一和混合感染鉴别诊断,具有快速、准确、简便的特点。

主 题 词：牛支原体 牛多杀性巴氏杆菌 牛结核分枝杆菌 三重PCR 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203948291...