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人von Willebrand因子A1A2A3三联体结构域的真核表达及功能鉴定研究

人von Willebrand因子A1A2A3三联体结构域的真核表达及功能鉴定研究

作     者:张婷婷 赵益明 江淼 阮长耿 ZHANG Ting-Ting;ZHAO Yi-Ming;JIANG Miao;RUAN Chang-Geng

作者机构:苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215007 

基  金:国家自然科学基金(编号30971287) 江苏省自然科学基金(编号BK2009108)资助项目 

出 版 物:《中国实验血液学杂志》 (Journal of Experimental Hematology)

年 卷 期:2010年第18卷第5期

页      码:1224-1228页

摘      要:本研究构建人血管性血友病因子A1A2A3区(vWF-A1A2A3)编码序列基因真核表达载体并在CHO细胞表达,为探讨vWF-A1A2A3的生物学功能奠定基础。根据已公布的序列设计引物,用PCR方法从vWF cDNA中扩增出人vWF-A1A2A3编码序列基因片段(vWF-A1A2A3),测序正确后用限制性内切酶将目的片段插入pSectag2b载体中。酶切后通过脂质体介导转染至CHO细胞中进行表达。结果表明:重组质粒pSectag2b-vWF-A1A2A3能在CHO细胞中表达,表达产物(rvWF-A1A2A3)能够与人Ⅲ型胶原结合和在瑞斯托霉素诱导下与血小板结合。结论:成功构建了rvWF-A1A2A3并表达于CHO细胞。本研究为vWF相关的生物学结构、功能研究和临床应用提供了基础。

主 题 词:von Willebrand因子 vWF-A1A2A3区 CHO 真核表达 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100201[100201] 100104[100104] 10[医学] 

馆 藏 号:203949053...

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