脆性X综合征FMRl基因CpG岛的甲基化程度分析

作     者：吴鼎文 竺智伟 赵正言 曲一平 杨建滨 WU Ding-wen;ZHU Zhi-wei;ZHAO Zheng-yan;QU Yi-ping;YANG Jian-bin

作者机构：浙江大学医学院附属儿童医院遗传代谢病科杭州310003 浙江大学医学院附属儿童医院儿童保健科杭州310003 

基　　金：浙江省出生缺陷早期筛查与干预技术创新团队 

出 版 物：《中华医学遗传学杂志》 (Chinese Journal of Medical Genetics)

年 卷 期：2013年第30卷第1期

页      码：60-63页

摘      要：目的建立用甲基化敏感性限制性内切酶定量聚合酶链反应（methylation-sensitiverestrictionenzymes-basedquantitativePCR，MSRE-qPCR）分析FMRl基因CpG岛甲基化程度的方法，并探讨其对脆性X综合征的诊断价值。方法以常规PCR初筛存在FMRl基因5。（CGG）n异常扩增的30例智力低下男童和20名母亲作为研究对象，用EagI酶消化DNA样品，针对FMRl基因CpG岛设计引物，定量PCR扩增EagI酶切前、后DNA，用2△△Ct法计算CpG岛甲基化程度；以Southern印迹杂交确诊的3例患儿和正常体检男、女各30例DNA样品为质控样本，从而建立优化的MSRE-qPCR方法。结果确立了正常甲基化、部分异常甲基化、全甲基化的区间值，并明确30例常规PCR初筛异常患儿中3例存在部分甲基化，27例为全甲基化，其中3例经Southern印迹杂交验证；13例母亲处于正常甲基化，7例存在异常甲基化。结论MSRE-qPCR可以对FMRl基因CpG岛的甲基化程度进行快速可靠分析，为脆性x综合征的分子诊断提供新的策略。

主 题 词：脆性X综合征 甲基化敏感性限制性内切酶定量聚合酶链反应 FMR1基因 CpG岛 甲基化 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100205[100205] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1003-9406.2013.01.014

馆 藏 号：203950142...