Src真核表达载体的构建与表达

作     者：吴杰 Wu Jie

作者机构：中国矿业大学 

出 版 物：《哈尔滨师范大学自然科学学报》 (Natural Science Journal of Harbin Normal University)

年 卷 期：2013年第29卷第5期

页      码：57-60页

摘      要：构建酪氨酸蛋白激酶Src真核表达载体,并检测其在HEK293T细胞中的表达.根据Genebank(GI:4574718)提供的大鼠Src的cDNA序列设计特异性引物,以大鼠海马总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增Src的目的基因,然后克隆至真核表达载体pcDNA3.1.将筛选的阳性重组子转染入HEK293T细胞系,免疫印迹检测Src的蛋白表达水平.经限制性内切酶双酶切及测序分析,扩增的Src的cDNA成功连接入pcDNA3.1,并且序列与Genebank中一致.免疫印迹结果表明,构建的Src-pcDNA3.1可在HEK293T细胞中表达.成功构建了Src-pcDNA3.1真核表达载体,并且可在HEK293T细胞中高效表达.

主 题 词：Src 酪氨酸蛋白激酶 真核表达载体 表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-5617.2013.05.018

馆 藏 号：203950574...