应用In—Fusion技术构建HBV基因组全长重组质粒及序列分析

作     者：张寻 赵洪兰 沈立萍 毕胜利 Zhang Xun;Zhao Honglan;Shen Liping;Bi Shengli

作者机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肝炎室北京102206 

基　　金：十二五国家重大专项 

出 版 物：《中华实验和临床病毒学杂志》 (Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology)

年 卷 期：2014年第28卷第2期

页      码：111-113页

摘      要：目的研究In—Fusion技术在HBV全进组克隆中的应用，并分析所获得的的序列信息。方法在浙江杭州地区收集23份慢性乙型肝炎患者血清，提取病毒核酸，分别设计PCR引物扩增病毒基因组和pMDl8T载体，采用In-Fusion方法构建基因组测序质粒，并对序列进行分析。结果成功扩增出了23条HBV基因组序列，向NCBI提交的24株HBV全长序列，测序结果分析显示，B基因型11例，C基因型12例，没有B＋C型，发现YMDD耐药株1例。结论***技术构建重组质粒是一种高效的连接方法，提高了连接率与成功率，可以大大简化目的片段与载体的连接，有效避免了在连接过程中常见的载体自连现象，探索了该技术在HBV序列研究中的初步应用。本研究丰富了我国的HBV全长基因组数据库，为HBV基因组特点、变异、药物、疫苗研究以及乙型肝炎的个体化治疗提供了参考依据。

主 题 词：肝炎病毒 乙型 克隆 分子 基因 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 100401[100401] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2014.02.012

馆 藏 号：203950680...