利用Gateway克隆技术构建丹参SmNAC1转录因子的RNAi表达载体

作     者：赵容 荣齐仙 刘玉忠 申业 黄璐琦 ZHAO Rong;RONG Qi-xian;LIU Yu-zhong;SHEN Ye;HUANG Lu-qi

作者机构：黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040 中国中医科学院中药资源中心北京100700 

基　　金：国家自然科学基金项目(81173490 81130070) 

出 版 物：《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2014年第39卷第9期

页      码：1569-1573页

摘      要：NAC转录因子参与植物生长发育和对生物和非生物胁迫的应答反应,利用Gateway克隆技术构建丹参NAC转录因子的RNAi植物表达载体,以便进一步研究丹参NAC转录因子的功能。根据Gateway技术要求,设计含有attB接头的引物,使用NEB的Phusion超保真聚合酶,通过PCR方法,扩增SmNAC1基因的特异性片段。通过BP重组反应,将带有attB接头的PCR产物克隆到入门载体pENTR/SD/D-TOPO上,再通过LR重组反应,利用入门载体上的SmNACi特异性基因片断克隆到植物表达载体pK7GWIWG2D上。实验结果表明Gateway载体的构建方法能够高效、快速地将目的基因克隆到表达载体上,为植物基因转化提供基础。

主 题 词：RNAi Gateway载体 BP和LR反应 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.4268/cjcmm20140905

馆 藏 号：203950681...