实时荧光逆转录重组酶介导的等温扩增技术检测寨卡病毒方法的建立

作     者：段青霞 李鑫娜 何小周 申辛欣 张瑞卿 白雪丁 凡国豪 高源 王金荣 陈子巍 张金艳 马学军 Duan Qingxia;Li Xinna;He Xiaozhou;Shen Xinxin;Zhang Ruiqing;Bai Xueding;Fan Guohao;Gao Yuan;Wang Jinrong;Chen Ziwei;Zhang Jinyan;Ma Xuejun

作者机构：河北医科大学研究生学院石家庄050017 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 河北医科大学第四医院检验科石家庄050011 

基　　金：国家传染病重大专项(2018ZX10711001、2017ZX10104001和2017ZX10302301-004-002) 侯云德院士科学研究青年基金(2019HYDQNJJ03) 

出 版 物：《国际病毒学杂志》 (International Journal of Virology)

年 卷 期：2020年第27卷第3期

页      码：242-246页

摘      要：目的建立一种实时荧光逆转录重组酶介导的等温扩增(reverse transcription recombinase-aided amplification,RT-RAA)技术检测寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)的方法,以实现ZIKV的现场快速筛查及诊断。方法通过基因组序列比对,选择ZIKV保守序列设计RT-RAA特异性引物和探针,并用系列稀释的ZIKV重组质粒与毒株核酸验证方法的灵敏性与重复性,通过检测登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼罗病毒等其他虫媒病毒验证方法的特异性。结果建立的RT-RAA方法可在39℃恒温条件下30 min内对ZIKV进行高效扩增,检测系列稀释的ZIKV重组质粒,其95%检测限可达到15拷贝/反应,特异性强,与登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼罗病毒虫媒病毒无交叉反应,且重复性好。结论本研究建立的ZIKV的RT-RAA等温扩增方法,具有反应迅速,无需精密仪器,操作简单等优点,适合于应急快速检测。

主 题 词：寨卡病毒 重组酶介导的等温扩增技术 快速检测 

学科分类：100208[100208] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 1002[医学-临床医学类] 100401[100401] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1673-4092.2020.03.015

馆 藏 号：203954358...