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环介导等温扩增法检测人粪样中美洲钩虫的方法建立

环介导等温扩增法检测人粪样中美洲钩虫的方法建立

作     者:危芙蓉 朱慧慧 贾孝凯 汪俊云 WEI Fu-rong;ZHU Hui-hui;JIA Xiao-kai;WANG Jun-yun

作者机构:中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所国家热带病研究心世界卫生组织热带病合作中心科技部国家级热带病国际联合研究中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025 

基  金:中国疾控中心寄生虫病所防治技术储备科研基金(No.CB-16005) 国家自然科学基金项目(No.81472923) 

出 版 物:《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期:2020年第36卷第7期

页      码:530-533页

摘      要:目的建立一种快速、高效的环介导等温扩增方法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测粪样中美洲钩虫虫卵。方法根据美洲钩虫ITS基因序列,设计4条LAMP引物,建立LAMP检测法。利用LAMP法检测日本血吸虫、肝吸虫、鞭虫、猪蛔虫、蛲虫的DNA样本以验证LAMP方法的特异度。以美洲钩虫成虫DNA样本,倍比稀释以评价LAMP法的DNA最低检出量。现场采集55份人粪DNA样本,采用改良加藤法、LAMP法和普通PCR方法同时检测,评价LAMP法的敏感性和特异性。结果LAMP法可特异性扩增美洲钩虫DNA样本。LAMP法可检测最低DNA浓度为1.2 fg/mL。通过现场样本对LAMP进行评价,LAMP法敏感性相对于改良加藤法和PCR法分别是95.24%和100%。特异性分别是97.06%和100%。结论建立起以虫卵为检测材料的检测美洲钩虫病的LAMP法,为美洲钩虫病提供特异、敏感、高效的检测方法。

主 题 词:美洲钩虫 环介导等温扩增 虫卵 ITS基因 

学科分类:1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1002-2694.2020.00.084

馆 藏 号:203954455...

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