Notch1信号通路激活在低氧诱导人脐静脉内皮细胞血管形成中的作用

作     者：石紫云 李艳川 刘飞飞 张雅 袁晓华 王淑娥 Ziyun Shi;Yanchuan Li;Feifei Liu;Ya Zhang;Xiaohua Yuan;Shue Wang

作者机构：710068 西安，陕西省人民医院产科 

基　　金：国家自然科学基金青年科学基金项目(81200418) 陕西省科技创新基地-科技资源开放共享平台项目(2018PT-12) 

出 版 物：《中华细胞与干细胞杂志（电子版）》 (Chinese Journal of Cell and Stem Cell(Electronic Edition))

年 卷 期：2020年第10卷第3期

页      码：163-171页

摘      要：目的观察低氧条件下HIF-1α/VEGF/Notch信号通路在人脐静脉内皮细胞（HUVEC）血管生成中的作用。方法将HUVEC进行常氧和低氧[二氯化钴（CoCl2），200 μmol/L]诱导，再将常氧和低氧处理的HUVEC应用Notch1信号通路的抑制剂DAPT （30 μmol/L，24 h）和激活剂JAG-1 （30 μmol/L，24 h）干预。通过体外小管形成实验观察低氧对HUVEC血管生成能力的影响。应用RT-PCR和Western blot检测HUVEC中低氧诱导因子-1α （HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶-9 （MMP-9）和Notch1信号分子（Notch1、Dell4和JAG-1）的mRNA和蛋白表达。通过Transwell迁移实验和伤口愈合实验观察低氧、DAPT、JAG-1对HUVEC迁移能力的影响。应用MTT法检测低氧及Notch1对HUVEC增殖的影响。两组间比较采用t检验，采用析因设计方差分析低氧和DAPT以及低氧和JAG-1对HUVEC迁移能力、距离、小管形成能力和细胞增殖的交互作用。结果与常氧组比较，低氧组小管总长[（8.18±0.62）mm比（15.43±1.32）mm]增高，差异具有统计学意义（P< 0.05）。与常氧组比较，低氧组的HIF-1α、VEGF、MMP-9、Notch1、Dell4和JAG-1的mRNA相对表达量和蛋白相对表达量（1.01±0.03比4.43±0.35，1.02±0.03比3.55±0.28，0.98±0.04比3.24±0.25，1.01±0.03比3.22±0.25，0.99±0.02比2.89±0.22，1.02±0.04比2.43±0.19，0.98±0.01比3.13±0.24，0.98±0.02比2.67±0.21，0.97±0.03比2.45±0.19，1.01±0.03比2.44±0.19，1.00±0.04比2.30±0.18，1.03±0.05比2.27±0.18）均升高，差异有统计学意义（P均< 0.05）。Transwell迁移实验和伤口愈合实验显示，低氧条件下，DAPT干预使HUVEC的迁移能力降低，JAG-1干预使HUVEC的迁移能力升高（P均< 0.05）。小管形成和MTT法测定显示，低氧条件下，DAPT干预使HUVEC的小管形成能力和细胞增殖能力降低，JAG-1干预使HUVEC的小管形成能力和细胞增殖能力升高（P均< 0.05）。析因设计的方差分析结果显示，低氧和JAG-1对迁移细胞数、小管形成和细胞增殖能力交互作用具有协同作用（P< 0.05）。结论低氧可通过激活HIF-1α/VEGF/Notch1信号通路提高HUVEC的血管生成能力、迁移能力和细胞增殖能力。

主 题 词：低氧 血管生成 人脐静脉内皮细胞 低氧诱导因子-1α 血管内皮细胞生长因子 Notch1 信号通路 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100101[100101] 10[医学] 

D　O　I：10.3877/cma.j.issn.2095-1221.2020.03.005

馆 藏 号：203954456...