日本血吸虫新基因——蛋白酶体激活因子PA28亚单位的发现与克隆

作     者：彭鸿娟 王瑾雯 陈晓光 高锦雄 

作者机构：中山大学生物防治国家重点实验室广东广州510275 第一军医大学寄生虫学教研室 第一军医大学学员一旅十九队 

基　　金：联合国发展开发署/世界银行/世界卫生组织热带病研究和培训特别规划署基金(A00690 A00191) 

出 版 物：《南方医科大学学报》 (Journal of Southern Medical University)

年 卷 期：2001年第25卷第S1期

页      码：1-4页

摘      要：目的将用EST策略及同源性搜索发现的日本血吸虫新基因——蛋白酶体激活因子PA28亚单位（proteasome activatorPA28 subunit,PA28）cDNA克隆到表达质粒pET32a（+）上,为下一步对该基因进行功能研究做准备。方法将插入于pTrip1Ex2质粒上的cDNA进行测序,测序结果经BLASTx程序搜索,发现该插入cDNA序列所编码的蛋白与小鼠肌肉内的PA28亚基蛋白高度同源。根据表达质粒pET32a（+）上的克隆位点及该cDNA序列设计PCR引物,将PCR产物纯化后连接到pMD 18-T载体上,将重组T载体经EcoRI/XhoI双酶切后切下的SjPA28基因导入原核可溶性表达质粒pET32a（+）中。结果所发现的cDNA所编码的蛋白与小鼠肌肉内的PA28亚基蛋白的同一性达41％,PCR产物的片段长度与预期大小一致,重组T载体及表达质粒经EcoRI/XhoI双酶切后证明具有与目标片段长度相符的插入片段。结论本研究所发现的cDNA所编码的蛋白与小鼠肌肉内的PA28亚基蛋白高度同源,并且已成功地构建出重组表达质粒pET32a（+）-SjPA28。

主 题 词：日本血吸虫 曼氏血吸虫 蛋白酶体激活因子PA28亚单位 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

核心收录：

馆 藏 号：203955672...