北美洲流行汉坦病毒多重荧光定量RT⁃PCR检测方法的建立

作     者：李乃哲 李阿茜 李建东 李德新 梁米芳 王世文 LI Naizhe;LI Aqian;LI Jiandong;LI Dexin;LIANG Mifang;WANG Shiwen

作者机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 中国科学院生物安全大科学研究中心北京100049 

基　　金：国家科技重大专项(项目号:2018ZX10711-001) 题目:病毒感染高通量快速检测与应急筛查技术研究 

出 版 物：《病毒学报》 (Chinese Journal of Virology)

年 卷 期：2020年第36卷第4期

页      码：617-623页

摘      要：为了建立牛轭湖病毒(Bayou virus,BAYV)、纽约病毒(New York virus,NYV)、厄尼诺洛峡谷病毒(El Moro Canyon virus,ELMCV)以及岛景病毒(Isla Vista virus,ISLAV)四种病毒快速筛查、诊断的核酸检测技术,本研究选用上述四种病毒的N蛋白基因作为靶标区域设计四组特异性引物探针,建立四重实时荧光定量RT-PCR检测方法。用四种病毒体外转录RNA进行灵敏度和重复性验证,并使用其他病毒细胞培养物及体外转录RNA进行特异性验证。结果显示,四重实时荧光定量PCR扩增效率均可达到95%以上,四种病毒体外转录RNA灵敏度介于1~10拷贝/μL,与单重检测方法无明显差异,且与其他病毒无交叉反应。稳定性评价结果显示,批内、批间变异系数均在3%以内。本研究所建立的检测方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于相关样本的诊断与筛查。

主 题 词：四重实时荧光定量RT-PCR 牛轭湖病毒(BAYV) 纽约病毒(NYV) 厄尼诺洛峡谷病毒(ELMCV) 岛景病毒(ISLAV) 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003767

馆 藏 号：203956266...