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β-葡萄糖苷酶在酿酒酵母表面上的展示及酶学性质的研究

β-葡萄糖苷酶在酿酒酵母表面上的展示及酶学性质的研究

作     者:姚淑敏 倪娜 徐朝阳 杨革 YAO Shu-min;NI Na;XU Zhao-yang;YANG Ge

作者机构:曲阜师范大学生命科学学院山东省曲阜市273165 南京林业大学江苏省制浆造纸科学与技术重点实验室江苏省南京市310037 

基  金:江苏省制浆造纸科学与技术重点实验室开放基金(200901) 曲阜师范大学博士启动基金资助项目 

出 版 物:《曲阜师范大学学报(自然科学版)》 (Journal of Qufu Normal University(Natural Science))

年 卷 期:2011年第37卷第3期

页      码:81-86页

摘      要:根据裂殖酵母的β-葡萄糖苷酶的基因序列和酒精酵母菌表面展示质粒载体pYD1上的多克隆位点设计引物,从裂殖酵母中提取总RNA,然后反转录扩增得到β-葡萄糖苷酶基因(bglA),把该基因连接到表面展示质粒载体pYD1上,成功构建了重组质粒pYD1-bglA,并转化用于表面展示的酵母EBY100菌株中,得到酵母转化子,提取酵母菌的DNA通过PCR扩增证实了β-葡萄糖苷酶基因已整合到酵母基因组中.以不含载体和含空载体的酵母菌为对照,加2%(w/v)的半乳糖诱导48 h后,利用免疫荧光法在荧光显微镜下检测到了来源于裂殖酵母的β-葡萄糖苷酶展示在酵母菌细胞表面,并对其酶学性质进行分析研究.

主 题 词:裂殖酵母 β-葡萄糖苷酶基因 酵母菌表面展示系统 免疫荧光法 酶活测定 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.3969/j.issn.1001-5337.2011.03.018

馆 藏 号:203956925...

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