绵羊GDF9基因G1突变可视化检测方法的建立

作     者：刘莉 姚瑞 徐越仁 李慧向 张梦丹 胡圣伟 LIU Li;YAO Rui;XU Yueren;LI Huixiang;ZHANG Mengdan;HU Shengwei

作者机构：石河子大学生命科学学院新疆石河子832003 

基　　金：国家自然科学基金项目(31660644) 新疆生产建设兵团国际科技合作计划项目(2018BC011) 

出 版 物：《河南农业科学》 (Journal of Henan Agricultural Sciences)

年 卷 期：2020年第49卷第8期

页      码：136-142页

摘      要：为了建立快速可视化检测绵羊生长分化因子9基因(Growth differentiation factor 9,GDF9)G1突变的方法,针对绵羊GDF9基因G1突变设计扩增阻滞突变系统(Amplification refractory mutation system,ARMS)特异性引物,并在其下游引物3′端的第2—4位碱基处设计额外的错配以筛选特异性最佳的引物对,将改良的ARMS与核酸染料SYBR GreenⅠ结合,可视化检测GDF9基因G1突变。结果显示,改良的ARMS特异性引物能够区分突变型和野生型,通过整合改良的ARMS与SYBR GreenⅠ可视化检测G1突变,发现已知突变型样本显示亮绿色,而已知野生型样本显示橙黄色,两者颜色变化明显。采用建立的可视化检测绵羊GDF9基因G1突变的方法检测25个小尾寒羊样本,结果表明,该方法能够准确区分绵羊GDF9基因G1突变的野生型和突变型,其检测结果与测序结果相符,准确度高达100%。可见,建立的可视化检测方法可用于检测绵羊GDF9基因G1突变。

主 题 词：绵羊 GDF9基因 G1突变 可视化检测 ARMS SYBR GreenⅠ 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 0905[农学-林学类] 09[农学] 071007[071007] 0836[0836] 090501[090501] 

D　O　I：10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.08.017

馆 藏 号：203958084...