家蝇抗真菌衍生肽Mt6-21DLeu抗白色念珠菌活性及其机制研究

作     者：花璇 王涛 毕言伟 陶裕凯 孔德龙 汤仁仙 吴建伟 HUA Xuan;WANG Tao;BI Yan-wei;TAO Yu-kai;KONG De-long;TANG Ren-xian;WU Jan-wei

作者机构：江苏省免疫与代谢重点实验室江苏徐州221004 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室贵州贵阳550025 

基　　金：国家自然科学基金项目(No.81360254) 江苏省高校优势学科建设工程项目(No.PAPD) 江苏省高校青蓝工程资助项目(2017) 贵州省科技计划项目学术新苗培养专项项目(黔科合平台人才5779-22) 

出 版 物：《中国病原生物学杂志》 (Journal of Pathogen Biology)

年 卷 期：2020年第15卷第7期

页      码：761-767页

摘      要：目的设计家蝇抗真菌肽MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu,探讨其抗白色念珠菌(Candida albicans,Ca)活性及作用机制。方法通过氨基酸替换法设计MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu;采用微量液体稀释法测定Mt6-21DLeu对Ca的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MFC)以及不同环境中Mt6-21DLeu对Ca抑菌活性的变化;通过时间-杀菌曲线反映Mt6-21DLeu对Ca的杀菌动力学;通过结晶紫染色测定Mt6-21DLeu对Ca不同阶段生物被膜的清除作用;采用多功能酶标仪检测荧光探针DPH的相对荧光密度;荧光显微镜观察Mt6-21DLeu的细胞膜通透性;采用流式细胞仪检测Mt6-21DLeu影响Ca活性氧ROS生成的影响。结果与MAF-1A相比,Mt6-21DLeu抑制Ca生长的效果提高近5倍,其MIC和MFC分别为0.128 mg/ml和0.256 mg/ml。在盐离子环境中,Mt6-21DLeu活性几乎不受影响,胰酶环境对Mt6-21DLeu有所抑制但远小于对MAF-1A活性的干扰。时间-杀菌曲线结果显示在MIC和2 MIC浓度下,Mt6-21DLeu于9 h后逐渐抑制Ca的生长;4 MIC浓度时Mt6-21DLeu的杀菌能力增强。Mt6-21DLeu在4、24、48 h时均能部分清除Ca已形成的生物被膜,清除效果与Mt6-21DLeu的浓度有关;4 MIC浓度的Mt6-21DLeu能显著增加Ca细胞膜的流动性(P<0.01)及通透性,进而引起Ca菌体内ROS的积累。结论衍生肽Mt6-21DLeu能高效、持久、稳定地抑杀Ca,其抗菌作用可能通过增强细胞膜通透性、促进胞内ROS积累的多靶点模式实现。因此,可将Mt6-21DLeu作为治疗Ca感染的候选药物分子。

主 题 词：家蝇 抗菌肽 衍生肽 白色念珠菌 抑菌活性 活性氧 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13350/j.cjpb.200704

馆 藏 号：203961585...