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A型H1N1及H3N2亚型流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立

A型H1N1及H3N2亚型流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立

作     者:杨素 陈博文 沙才华 廖明 秦爱建 徐海聂 廖秀云 罗宝正 薄清如 陈伟生 

作者机构:扬州大学兽医学院江苏扬州225009 珠海出入境检验检疫局广东珠海519015 华南农业大学兽医学院广东广州510642 

基  金:广东省农业攻关项目(2007B020803004) 广东省农产品安全生产关键技术研究与示范重点专项(2009A020101006) 珠海市科技项目(PC20071055) 珠海出入境检验检疫局科技项目(ZH2009-1) 

出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期:2010年第40卷第3期

页      码:245-251页

摘      要:根据A型H1N1亚型流感病毒2009年北美变异株和H3N2亚型流行株的基因序列,设计了3套特异性引物、TaqMan探针,分别用不同的荧光基团标记,以构建的A型流感病毒及H1N1和H3N2亚型流感病毒基因重组质粒作为阳性对照,经反应条件优化,特异性、敏感性和重复性试验,筛选出3套不同的反应体系及同一个反应参数,建立了可同时检测A型流感病毒、H1N1和H3N2亚型流感病毒的实时荧光RT-PCR方法。结果表明,该方法可特异地检测H1N1(人源、猪源)、H3N2(猪源),禽流感病毒H5、H9等A型流感病毒,且与新城疫病毒、减蛋综合征病毒等其他病毒不发生交叉反应,具有特异、敏感、重复性好、快速、费用低廉等优点,试验耗时仅3h。表明,建立的方法,一次试验即可完成A型流感病毒的初筛和H1N1、H3N2亚型流感病毒的初步确认定型。

主 题 词:A型流感病毒 H1N1亚型 H3N2亚型 实时荧光RT-PCR 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.16656/j.issn.1673-4696.2010.03.006

馆 藏 号:203964160...

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