特异性siRNA质粒的构建及其抑制癌细胞中mcl-1表达的研究

作     者：徐爱群 曹以诚 区镜深 张珍武 XU Ai-qun;CAO Yi-cheng;OU Jing-shen;ZHANG Zhen-wu

作者机构：华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006 

基　　金：国家自然科学基金重大研究项目(90412015) 教育部中国网格计划生物信息网格平台子项目(B12137040130) 国家科技基础条件平台项目(2005DKA64001) 科技部基础学科平台建设生物计算网络平台项目(2005DKA64001) 广州市科技攻关计划(2005Z12E4023)资助项目 

出 版 物：《现代食品科技》 (Modern Food Science and Technology)

年 卷 期：2010年第26卷第8期

页      码：789-792,783页

摘      要：本文构建了靶向mcl-l基因构建的特异性siRNA重组质粒,在细胞水平检测的其抑制效果,并筛选出能高效抑制mcl-l基因表达的siRNA重组质粒,针对mcl-1的特异性siRNA重组质粒,将其转染到人肝癌细胞HepG2,用Rt-PCR(实时荧光定量PCR)方法和WesternBlot方法分别检测转染前后mcl-1mRNA水平和Mcl-1蛋白表达水平,比较对应不同位点的两个siRNA重组质粒对mcl-1的抑制效果。结果表明,Rt-PCR结果显示对应不同位点的两个siRNA重组质粒对mcl-1均可降低mcl-1mRNA水平,最大抑制效率达70.0%,远高于作为对照非相关组;Western-Blot结果显示转染特异性siRNA重组质粒后Mcl-1蛋白表达受到抑制,最大抑制率为44.2%。合理设计的特异性siRNA重组质粒可大幅度下调mcl-1mRNA水平,能有效抑制Mcl-1蛋白表达。

主 题 词：肝癌 mcl-1 基因沉默 实时荧光定量PCR 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-9078.2010.08.005

馆 藏 号：203964296...