锁阳ISSR-PCR反应体系的优化研究

作     者：李伟 刘广达 陈青 呼思勒 陈贵林 Li Wei;Liu Guangda;Chen Qing;Hu Sile;Chen Guilin

作者机构：内蒙古大学生命科学学院呼和浩特010021 暨南大学生命科学技术学院广州510632 

基　　金：国家科技支撑计划项目(2011BAI07B07) 内蒙古科技创新引导奖励资金项目(2010) 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2012年第28卷第8期

页      码：135-140页

摘      要：通过单因素试验、正交试验的方法,对影响锁阳ISSR-PCR反应体系的7种主要因素在3个水平上进行优化筛选,得到锁阳ISSR-PCR反应的最佳体系:25μL反应体系中含有0.2 mmol/L dNTP、1.5 mmol/L Mg2+、10μmol/L引物、50 ng模板DNA、2.0 UTaq酶、1%去离子甲酰胺和2.5μg/μL牛血清白蛋白。相应引物的最佳退火温度为48.9℃。这一体系的建立为今后利用ISSR-PCR标记技术研究锁阳的遗传多样性奠定了基础。同时对ISSR-PCR体系中添加剂的作用进行了探讨,为添加剂在其他植物ISSR-PCR反应中的应用提供借鉴。

主 题 词：锁阳 正交设计 ISSR 优化 

学科分类：1008[医学-中药学类] 10[医学] 

D　O　I：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2012.08.017

馆 藏 号：203965288...