基于CRISPR系统的双孢蘑菇基因编辑体系建立及应用

作     者：吕阳 贺晓飞 王佩 刘世玲 韩少鹏 曾弓剑 周雁 沈祥陵 LV Yang;HE Xiaofei;WANG Pei;LIU Shiling;HAN Shaopeng;ZENG Gongjian;ZHOU Yan;SHEN Xiangling

作者机构：三峡区域植物遗传与种质创新重点实验室湖北宜昌443002 宜昌市农业科学研究院湖北宜昌443000 华中农业大学应用真菌研究所湖北武汉430070 

基　　金：国家自然科学基金(31601804) 

出 版 物：《食用菌学报》 (Acta Edulis Fungi)

年 卷 期：2020年第27卷第3期

页      码：16-22页

摘      要：根据CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)/Cas(CRISPR-associated)基因编辑技术,设计AbPPO4特异性导向RNA,构建双孢蘑菇(Agaricus bisporus)基因编辑载体pAbGEB1-AbPPO4,再通过农杆菌介导转化双孢蘑菇菌丝体建立基因编辑体系,观察菌丝生长状况。结果表明:获得12株转化子,1号和7号的菌丝体中存在潮霉素抗性基因,且AbPPO4基因的相对表达量较低,分别为0.28±0.04和0.47±0.02,与对照组相比,组间差异均具有统计学意义(P<0.05),说明1号和7号转化子的菌丝体AbPPO4基因表达受到了抑制;与对照组相比,1号和7号转化子的菌丝体中AbPPO4基因均发生了突变,1号和7号分别产生了4 bp和11 bp的碱基缺失,证明设计的CRISPR/Cas9系统在双孢蘑菇内对AbPPO4基因成功地进行了编辑;同时发现AbPPO4基因突变后对双孢蘑菇菌丝体的生长产生了不利影响。

主 题 词：双孢蘑菇 基因编辑 遗传转化 多酚氧化酶 

学科分类：09[农学] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090202[090202] 

D　O　I：10.16488/j.cnki.1005-9873.2020.03.003

馆 藏 号：203965865...