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基于DPO引物的空肠弯曲菌PCR检测方法的建立与初步应用

基于DPO引物的空肠弯曲菌PCR检测方法的建立与初步应用

作     者:徐义刚 李丹丹 刘忠梅 吴岩 魏冬旭 李苏龙 XU Yi-gang;LI Dan-dan;LIU Zhong-mei;WU Yan;WEI Dong-xu;LI Su-long

作者机构:黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心黑龙江哈尔滨150001 海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心海南海口570125 

基  金:国家质检总局科技计划项目(2012IK157 2013IK051) 质检公益性行业科研专项(201310126) 

出 版 物:《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期:2014年第36卷第4期

页      码:293-296页

摘      要:为建立特异、快速检测空肠弯曲菌的方法,本研究针对其gyrA基因设计了一对双启动寡核苷酸引物(DPO),建立了空肠弯曲菌DPO-PCR检测方法。试验结果显示,该方法的检测下限为1.2×10^2cfu/mL,在48℃~68℃退火温度范围内均可高效扩增靶基因片段,表明该方法退火温度范围宽,同时DPO引物特异性强,PCR反应过程中不会产生非特异性扩增。利用该方法对采集的184份样品进行检测,共计检出17份空肠弯曲菌阳性样品,经国标法(GB/T 4789.9-2008)复验,两者检测结果一致,显示了良好的实用性。该DPO-PCR方法设计简单、特异性强,为致病微生物的快速准确检测提供了新方法。

主 题 词:空肠弯曲菌 gyrA基因 DPO-PCR 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1008-0589.2014.04.10

馆 藏 号:203965986...

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