适用于镰刀菌基因敲除和荧光融合蛋白表达的高效通用载体的构建

作     者：王晓亮 张昊 潘逸 许景升 徐进 冯洁 Wang Xiaoliang;Zhang Hao;Pan Yi;Xu Jingsheng;Xu Jin;Feng Jie

作者机构：中国农业科学院植物保护研究所、植物病虫害生物学国家重点实验室北京100193 

基　　金：国家自然科学基金项目(31201477) 国家国际合作专项(2013DFG31930) 公益性行业(农业)科研专项(201303016) 

出 版 物：《植物保护》 (Plant Protection)

年 卷 期：2014年第40卷第3期

页      码：106-112页

摘      要：本文通过使用USER酶克隆技术,构建一系列用于镰刀菌基因敲除和荧光融合蛋白表达,并且操作简单快速的通用载体。在hph基因两侧引入USER酶特异位点,构建了基因敲除载体pKH-KO,可以一步在hph的两侧同时插入上下游同源重组片段;在gfp基因5′端引入USER位点构建了荧光融合蛋白表达载体pKHGFPE和pKNGFPE。此方法构建的载体在插入目的片段时均不用考虑酶切位点,极大地方便了试验设计,并且步骤简单,操作简便,节约大量时间。在大规模进行基因敲除以及相关蛋白定位等基因功能研究上具有广阔的应用前景。

主 题 词：镰刀菌 基因功能 载体构建 USER酶 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.0529-1542.2014.03.018

馆 藏 号：203966050...