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非洲猪瘟病毒LFD-RPA快速检测方法的建立

非洲猪瘟病毒LFD-RPA快速检测方法的建立

作     者:林彦星 吴江 赵现锋 史卫军 刘建利 曹琛福 曾少灵 阮周曦 花群义 LIN Yan-xing;WU Jiang;ZHAO Xian-feng;SHI Wei-jun;LIU Jian-li;CAO Chen-fu;ZENG Shao-ling;RUAN Zhou-xi;HUA Qun-yi

作者机构:深圳海关动植物检验检疫技术中心广东深圳518045 

基  金:国家重点研发计划项目(2018YFC0840401,2016YFD0500708) 海关总署科研项目(2019HK019) 

出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期:2020年第50卷第8期

页      码:952-956页

摘      要:本研究根据非洲猪瘟病毒(ASFV)B646L基因保守序列设计nfo RPA特异性引物和探针,建立了ASFV核酸LFD-RPA快速检测法。结果表明,该方法特异性强,与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪A型塞内卡病毒(SVA)等病原核酸无交叉反应;最低可以检测到1.57×10^2copies/μL重组质粒pUC-B646L;检测时间短,其中RPA扩增20 min,LFD检测10~20 min。应用该法及OIE推荐的荧光PCR法对24个模拟样品进行检测,检测结果一致。对50份已知的临床样品核酸进行检测,阳性符合率为73.3%。上述结果表明,本研究建立的LFD-RPA快速检测方法操作简便,为ASFV现场快速检测提供了技术支持。

主 题 词:非洲猪瘟病毒 重组酶聚合酶扩增 侧流层析试纸条 快速检测 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0144

馆 藏 号:203966566...

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