CXCR4基因沉默对黑色素瘤侵袭和转移影响的实验研究

作     者：吴包金 李文鹏 丁伟 周兆平 周仲文 顾小叶 江华 

作者机构：复旦大学附属华山医院整形外科上海200040 浙江大学医学院附属第二医院整形外科 复旦大学附属华山医院病理科 复旦大学附属华山医院中心实验室 第二军医大学附属长征医院整形外科 

基　　金：上海市卫生局科研课题(20114211) 

出 版 物：《医学研究杂志》 (Journal of Medical Research)

年 卷 期：2016年第45卷第5期

页      码：53-58页

摘      要：目的探讨CXCR4基因沉默对黑色素瘤侵袭及转移的影响及可能机制。方法设计合成CXCR4特异性短发夹状RNA(shRNA)插入p Silencer载体,转染人高转移性黑色素瘤细胞株MV3、RT-PCR和Western blot法检测shRNA对靶基因CXCR4表达的影响。利用Transwell小室模型检测细胞体外侵袭能力,MTT法检测细胞体外增殖能力。通过裸鼠尾静脉瘤细胞注射,将转染后的细胞接种至裸鼠皮下,构建黑色素瘤转移模型,观察肿瘤生长情况。结果 CXCR4-shRNA能有效下调CXCR4基因的表达,降低黑色素瘤细胞增殖、体外侵袭及转移能力。RT-PCR及细胞免疫荧光显示,转染CXCR4-shRNA的黑色素瘤瘤MV3细胞系MMP-2表达下调;免疫组化结果显示,实验组裸鼠黑色素瘤瘤体及转移灶组织MMP-2的表达低于对照组。结论 shRNA介导的CXCR4基因沉默在体外实验能够显著抑制黑色素瘤细胞的生长和增殖活性,减弱体外侵袭能力,且体外产生抑瘤效应,明显降低肝、脑器官转移能力和定向肺转移能力。其机制可能与SDF-1/CXCR4信号途径阻断,进而抑制MMP-2的表达有关。

主 题 词：黑色素瘤 趋化因子受体CXCR4 基因沉默 肿瘤转移 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.11969/j.issn.1673-548X.2016.05.013

馆 藏 号：203966986...