shRNA抑制SGC7901胃癌细胞绿色荧光蛋白基因的表达

作     者：马晋平 詹文华 汪建平 彭俊生 高劲松 朱孝峰 殷勤伟 MA Jin,ping,ZHAN Wen,hua,WANG Jian,ping,PENG Jun,sheng,GAO Jing,song,ZHU Xiao,feng,YIN Qin,wei.Department of General Surgery,First Affiliated Hospital,Sun Yat,sen University,Guangzhou 510080,China

作者机构：中山大学附属第一医院胃肠外科广州510080 

基　　金：国家自然科学基金(30271276 30271469) 广东省自然科学基金(021891) 

出 版 物：《外科理论与实践》 (Journal of Surgery Concepts & Practice)

年 卷 期：2004年第9卷第3期

页      码：221-223,229页

摘      要：目的:观察针对绿色荧光蛋白(GFP)基因的发夹结构RNA(smallhairpinRNA,shRNA)表达载体(SHipU6GFP)对SGC7901胃癌细胞中GFP的抑制作用。方法:设计针对GFP基因的shRNA序列,构建SHipU6GFP质粒。采用质粒pCXGFP(5510bp)和含有鼠U6启动子pU6(3.3kb)质粒,应用LipofectamineTM2000将pCXGFP质粒和SHipU6GFP质粒转染SGC7901细胞。荧光显微镜观察转染效果和不同时间的转染效率。结果:质粒SHipU6GFP经酶切电泳后,出现3.3kb和约350bp条带,与实验设计的针对GFP的shRNA长度相符。说明本实验已成功构建了针对绿色荧光蛋白GFP基因的SHipU6GFP质粒。SGC7901细胞中观察到转染pCXEGFP质粒和SHipU6GFP质粒前后发绿色荧光的细胞数目明显减少。结论:shRNA可以有效地抑制SGC7901细胞中GFP基因的表达。

主 题 词：RNA干扰 短发夹RNA 绿色荧光蛋白 胃肿瘤 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-9610.2004.03.016

馆 藏 号：203967554...