基于mt DNA cyt b基因兔睾丸鉴定方法的建立及检测试剂盒的研制

作     者：王艳双 姜海瀛 李坦诚 艾金霞 高丽君 李明成 张丽华 孙丽媛 WANG Yan-shuang;JIANG Hai-ying;LI Tan-cheng;AI Jin-xia;GAO Li-jun;LI Ming-cheng;ZHANG Li-hua;SUN Li-yuan

作者机构：北华大学医学院吉林132013 北华大学医学技术学院吉林132013 北华大学吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心吉林132013 长春市食品药品检验研究所长春130000 吉林雷博科技有限公司吉林132013 

基　　金：吉林省科技发展计划项目(20180201023YY,20190303093SF,20190301014NY,20200404152YY,20200403047SF) 吉林省发改委项目(2018C048-2) 吉林省科技创新中心建设项目(20190902018TC) 

出 版 物：《药物分析杂志》 (Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis)

年 卷 期：2020年第40卷第8期

页      码：1376-1383页

摘      要：目的:建立兔睾丸DNA指纹鉴定方法,研发出兔睾丸DNA检测试剂盒。方法:以穴兔线粒体DNA(mt DNA)细胞色素b(cyt b)基因作为靶基因,设计兔睾丸特异性引物,利用现代DNA指纹技术,研制兔睾丸DNA提取及检测试剂,并对试剂的特异性、重复性及稳定性进行考察;应用分子克隆及测序技术,克隆兔睾丸DNA检测的标准品;进而建立兔睾丸DNA指纹鉴定方法,制定质量标准,开发出兔睾丸DNA检测试剂盒。结果:自主研发的试剂提取的兔睾丸DNA结构完整性较好,DNA浓度与纯度均较高;59℃时引物的特异性最强;兔睾丸正品均在326 bp处出现1条特异性扩增条带,而阴性及空白对照均未出现扩增条带;克隆测序后的兔睾丸DNA序列与穴兔mt DNA特异指纹区段同源性100%。结论:本研究建立的兔睾丸DNA指纹鉴定方法特异、准确、可靠,研发的DNA检测试剂盒操作简便,结果稳定,适于普及推广使用。

主 题 词：兔睾丸 线粒体DNA细胞色素b基因 DNA指纹技术 PCR技术 分子克隆 基因测序 DNA检测试剂盒 

学科分类：1007[医学-药学类] 100704[100704] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.16155/j.0254-1793.2020.08.06

馆 藏 号：203968248...