白木香AsERF1基因的克隆、亚细胞定位与表达分析

作     者：李铁铮 郑一哲 戎玉清 魏胜利 王晓晖 屠鹏飞 LI Tie-zheng;ZHENG Yi-zhe;RONG Yu-qing;WEI Sheng-li;WANG Xiao-hui;TU Peng-fei

作者机构：北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 北京中医药大学中药学院中药资源与鉴定系北京100029 

基　　金：北京中医药大学青年教师项目(2019-JYB-JS-014) 

出 版 物：《药学学报》 (Acta Pharmaceutica Sinica)

年 卷 期：2020年第55卷第8期

页      码：1957-1964页

摘      要：乙烯响应因子(ethylene-response factor,ERF)是AP2/ERF家族中的亚家族,在植物信号转导、生长发育和植物防御反应中起到重要作用。本研究以白木香(Aquilaria sinensis)为材料,设计特异性引物,克隆了白木香的AsERF1基因的cDNA序列,并进行氨基酸序列分析、原核表达和纯化、亚细胞定位、组织特异性分析、非生物胁迫诱导表达分析研究。白木香AsERF1基因的开放阅读框(ORF)长691 bp,编码229个氨基酸,其蛋白分子质量为25.36 kD。AsERF1蛋白含有1个保守的AP2区域,系统进化树分析表明AsERF1与毛果杨的ERF2蛋白亲缘性最高。利用本生烟瞬时表达系统研究表明AsERF1主要定位于植物细胞核中。构建原核表达载体pET28a-AsERF1,并在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达AsERF1重组蛋白,纯化得到可溶性重组蛋白。实时荧光定量PCR结果显示AsERF1在叶中的表达量最高,茎次之,根和茎尖最低。盐、干旱、低温和重金属胁迫能够诱导AsERF1的表达,其中干旱胁迫对AsERF1的表达水平影响最显著。本研究为揭示ERF基因在白木香防御反应和沉香形成过程中的作用机制奠定基础。

主 题 词：白木香 乙烯响应因子 原核表达 亚细胞定位 表达分析 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100703[100703] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.16438/j.0513-4870.2020-0176

馆 藏 号：203968617...