新型染料配基对碱性磷酸酶的亲和纯化

作     者：王静云 彭孝军 杨冬 包永明 安利佳 郑学仿 

作者机构：大连理工大学化工学院生物工程系 精细化工国家重点实验室 东北林业大学黑龙江哈尔滨150040 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(29676006) 

出 版 物：《高校化学工程学报》 (Journal of Chemical Engineering of Chinese Universities)

年 卷 期：2001年第15卷第6期

页      码：563-567页

摘      要：设计合成了一种含有碱性磷酸酶抑制剂——对氨基苯磷酸的新型偶氮染料配基并将其偶联到凝胶Sepharose CL-6B 上,制备出新型的亲和层析介质,分离纯化小牛肠中的碱性磷酸酶。通过考察不同配基密度的层析介质对碱性磷酸酶的选择性,得出配基密度为4.55mg 配基(g 湿胶)-1的层析介质选择性高。用NaCl和Na2HPO4进行阶段洗脱,可使酶的纯化倍数一步达到65倍,活力回收率达到89%。通过测定不同配基浓度下酶的动力学,发现新合成的配基是碱性磷酸酶的竞争性抑制剂,其KI为3.0×10-3mol L-1。

主 题 词：亲和层析 染料配基 偶氮染料 碱性磷酸酶 纯化 分离 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 081704[081704] 07[理学] 0817[工学-轻工类] 08[工学] 0703[理学-化学类] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1003-9015.2001.06.010

馆 藏 号：203971299...