NELL2a在斑马鱼神经丘的表达及其突变模型构建

作     者：陈二方 邱阳 王人凤 刘珍珍 石力 查定军 邱建华 Chen Erfang;Qiu Yang;Wang Renfeng;Liu Zhenzhen;Shi Li;Zha Dingjun;Qiu Jianhua

作者机构：中国人民解放军空军军医大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科西安710032 

基　　金：国家自然科学基金海外重大合作项目(81120108008) 

出 版 物：《听力学及言语疾病杂志》 (Journal of Audiology and Speech Pathology)

年 卷 期：2020年第28卷第5期

页      码：545-549页

摘      要：目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建NELL2a基因突变模型,为探究NELL2a在非综合型听神经病谱系障碍(auditory neuropathy spectrum disorder,ANSD)发生发展中的作用奠定基础。方法通过原位杂交技术,证实NELL2a基因在侧线神经丘表达,针对斑马鱼NELL2a基因,设计gRNA靶位点,体外合成gRNA和Cas9 RNA,在胚胎发育的单细胞期,通过显微注射的方法,将其注射入胚胎内。待仔鱼发育至一定时期,通过尾鳍鉴定,进而获得NELL2a F0代,后续通过F0代侧交,获得F1代杂合子,通过F1代自交获得F2代纯合子。通过听觉诱发电位(AEP)检测F2代纯合子的听力状态。结果通过测序证明已经获得NELL2a(ΔGC)纯合子,Nell2a^-/-斑马鱼在600、800、1000和2000 Hz声刺激频率的AEP阈值均显著高于野生型斑马鱼。结论NELL2a表达于斑马鱼侧线神经丘,推测其对神经丘毛细胞的功能起着重要作用,具体机制有待进一步研究。

主 题 词：NELL2a 斑马鱼 基因编辑 突变模型 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100213[100213] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1006-7299.2020.05.014

馆 藏 号：203974946...